Analisa Malachite Green pada Ikan

Pada pembahasan kali ini saya akan mencoba untuk membahas tentang Analisa Malachite Green pada ikan, tentunya bagi anda yang bekerja di bagian Laboratorim seafood pasti sudah tidak asing lagi dengan Malachite Green, bahakan mungkin sudah mahir dalam menganalisanya? terlepas dari bisa atau tidak anda dalam menganalisa Malachite Green, yang terpenting adalah kita harus tetap belajar dan belajar agar analisa kita bisa sesuai dengan standart yang di inginkan. Bila anda ingin tahu cara analisa Malachite Green, lanjutkan membaca artike ini sampai selesai. Selamat belajar.....
Seperti biasanya hal-hal yang harus di perhatikan sebelum Analisa:

• Temperatur ruangan di usahakan di kisaran 20-25 derajat celcius.
• Perhatikan tanggal batas pemakaian tes kitts.
• Jangan mencampur media kitts dari box kitts yang berbeda perhatikan nomor lott setiap box.
• Usahakan pada saat analisa Malachite Green tidak di bawah AC secara langsung.
• Selalu menjaga kebersihan ruangan untuk menghindari terjadinya kontaminasi.
• Mengelurkan teskitts yang mau digunkan 20 menit sebelumnya.

1. Ambil sample 100 gr, haluskan dengan blender
2. Ambil 2 gr sample yang sudah di haluskan masukan kedalam tabung berukuran 10 ml
3. Tambahkan 1.5 ml 1x Extraction Buffer A + 1 x Ekraction Buffer B + 15 ml acetonitrie. setelah itu vortex selama 3 menit.
4. Centrifugal selama 10 menit pada kecepatan 4.000g
5. Setelah itu ambil Supernatan-nya 8ml masukan ke tabung yang lain, lalu tambahkan 12 ml dichloromethane dan aduk lebih kurang 1 menit.
6. Kemudian di Centrifuge selama 10 menit pada suhu ruang 20-25 derajat celcius
7. Pindahkan 3 ml pada lapisan bawah ketabung yang lain, dan di keringkan di atas aliran Gas Nitrogen pada suhu 600C.
8. Larutkan residu menggunkan 1.8 ml acetonitrie + 0.2 ml x Oxidant Sulution pada sample tersebut dan vortex kembai.
9. Setelah itu di Centrifugal selama 10 menit (4000 G) pada suhu ruang 20-25 derajat celcius
10. Ambil 1.5 ml dan di keringkan diatas waterbath yang dialiri Gas Nitrogen pada suhu 70 derajat celcius.
11. Setelah itu tambahkan 0.3 acetonitrie kedalam tabung sample masing-masing dan vortex 1 menit (homogenkan)
12. Ambil 50ul untuk di uji kedalam well.

Tahap Preparasi sample sudah selesai, sebelum meneruskan Analisa kita siapkan dulu pengencernya agar memudahkan kita pada tahap selanjutnya.

• 1 x Plate Activating
• 1 x HRP-Conjugate Antibody#2
• 1 x Wash Solution

1. Kelurkan Well dari tempatnya, suhu ruang harus di kisaran 20-25 derajat celcius
2. Masukan 50ul Negative Control dan each Malachite Green untuk standart (0,5, 1.5, 5, 10, 50 ng/mL) kedalam setiap Well dan tambahkan 50ul ke masing-masing Well.
3. Setelah itu tambahkan 100ul Antibody#1 kedalam setiap Well dan homogenkan dengan menggoyang Plat well tersebut kurang lebih 10 detik dan Incubasi selama 30 menit pada suhu 20-25 derajat celcius.
4. Setelah Incubasi 30 menit, buang Reagen yang ada di dalam Well tersebut dan lakukan pencucian dengan 250ul Washing solution yang sudah di encerkan, hal ini di lakukan sebanyak 3 kali.
5. Lalu tambahkan 150ul 1 x HRP-Conjugate Antibody #2 dan Incubasi 30 menit pada suhu ruang
6. Setelah 30 menit Incubasi, buang Reagen yang ada di dalam Well tersebut dan di lakukan pencucian dengan 250ul Washing solution yang sudah di encerkan, hal ini di lakukan sebanyak 3 kali.
7. Tambahkan 100ul TMB Substrat ke dalam setiap Well dan Incubasi selama 15 menit.
8. Tambahkan 100ul Stop Buffer kedalam setiap Well dan baca Absorbance-nya dengan menggunkan Reader Stat Fax 450 nm.
9. Setelah terbaca hasil Absorbance-nya, kemudian kita masukan hasil Absorbance-nya kedalam Software Antibiotic yang sudah di instal ke komputer.

Oke sekian dulu. Selanjutnya kita lanjutkan dengan bahasan analisa yang lainya. Bagai mana dengan analisa Malachite Green anda yang anda lakukan setiap hari sudah sesuai standartkah? Bila belum ceritakan masalah anda di anda melalaui blogger ini.


NB: Jika anda membutuhkan Training Analisa Antibiotik, Industri-General Trade Laboratory Chemical, Reagent Antibiotik, Equipment Supply bisa hubungi kami di 081331070937 / 03171830322. Terimakasih.

Salam Analist.